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THP-1(人单核细胞白血病)

2024-08-22

产品详情

简介

THP-1人单核细胞白血病细胞(STR鉴定正确)

一、细胞基本属性
细胞名称	THP-1人单核细胞白血病细胞
细胞别称	THP1; THP 1; THPI; THP-1(ATCC); Tohoku Hospital Pediatrics-1;人单核细胞白血病细胞
商品货号	ORC0194
种属来源	人
年龄性别	男
组织来源	急性单核细胞白血病,单核细胞
生长特性	悬浮生长
细胞形态	单核细胞
背景简介	THP-1细胞从一名1岁的患有急性单核细胞性白血病的男孩的外周血中分离建立。该细胞可以吞噬乳胶颗粒和激活的红细胞,细胞膜和胞浆内均没有免疫球蛋白,表达C3R和FcR;可受佛波酯TPA诱导向单核系方向分化;可作为转染宿主。
生物安全等级	1
细胞规格	1×10⁶cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
支原体检测	无
基因表达情况	lysozyme, HLA A2, A9, B5, DRw1, DRw2
保藏机构	ATCC; TIB-202 DSMZ; ACC-16 ECACC; 88081201
培养基	90% 1640+10% FBS+PS+ 0.05 mM 2-巯基乙醇(2-mercaptoethanol)
培养条件	气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
冻存条件	无血清冻存液,液氮储存
倍增时间	~36-72 hours
STR鉴定位点	Amelogenin:X,Y;CSF1PO:11,13;D13S317:8,13;D16S539:11,12;D18S51:13,14,15;D19S433:12.2,13,14;D21S11:29,30,31.2;D2S1338:17,18;D3S1358:15,16,17;D5S818:11,12;D7S820:10;D8S1179:10,14;FGA:22,24,25;TH01:7,8,9.3;TPOX:8,11;vWA:16;

二、细胞培养操作

1) 复苏细胞:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主。

将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1 mL 10%FBS 1640培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入6 cm皿中,加入约4 mL培养基,培养过夜。第二天检查细胞密度。

2) 细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。

方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心3-5min分钟,弃去上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

第一次传代时,若培养基中有细胞碎片,则将细胞悬液装入无菌离心管中,1000 rpm离心4 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀,按1:1分到新的装有10mL新鲜培养基的培养皿中,置于培养箱中培养。

3) 细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;

a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。

b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。

c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

三、培养注意事项

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。

2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等,确保细胞培养条件一致,若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由客户自行承担。

3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常现象。观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。

4. 贴壁细胞可以消化,悬浮细胞直接混匀收集细胞,900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,弃上清。加 5 mL PBS 重悬细胞,再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,,用新鲜的完全培养基重悬细胞,并接种到新的培养瓶或培养皿中,置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注:运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后第一次传代建议 1:2 传代。

9. 注意: 1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。

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