人脑静脉血管内皮细胞
Human cerebral vein endothelial cells
| 一、细胞基本属性 |
| 细胞名称 |
人脑静脉血管内皮细胞 |
| 组织来源 |
脑静脉组织 |
| 商品货号 |
ORCH117 |
| 种属来源 |
人 |
| 产品规格 |
5 × 105cells/T25细胞培养瓶 |
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细胞简介
|
人脑静脉血管内皮细胞分离自脑静脉组织;与脑动脉相比 ,脑静脉管壁较薄。与身 体其他部位的静脉不同 ,脑静脉管壁中没有静脉瓣 ,静脉血的回流依赖高位的势能 。脑静脉血的回流路径可以归纳为:大部脑静脉血经脑深部静脉和脑血窦流入颈内 静脉医|学教育网搜集整理;小部脑静脉血经眼部翼状静脉丛 ,进入静脉导血管再到 头皮 ,最后流入椎管中的椎旁静脉系统。脑静脉系统有大量交通枝静脉丛 ,即使两 侧颈内静脉都被阻塞 ,大脑静脉血仍可经椎静脉和颈外静脉系统完成其回流。脑静 脉血管内皮细胞的主要功能是维持血管内外的动态平衡 ,合成和分泌细胞因子和介 质参与免疫反应 ,维持凝血和纤溶的动态平衡。 |
| 包被条件 |
PLL(0.1mg/ml) , 明胶(0.1%) |
| 培养基 |
含FBS、生长添加剂、 Penicillin、 Streptomycin等 |
| 换液频率 |
每2-3天换液一次 |
| 生长特性 |
贴壁 |
| 细胞形态 |
内皮细胞样 |
| 传代特性 |
可传2-3代 |
| 传代比例 |
1:2 |
| 消化液 |
0.25%胰蛋白酶 |
| 培养条件 |
气相:空气 ,95%; CO2 , 5% |
方法简介:澳睿赛实验室分离的人脑静脉血管内皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来 ,细胞总量约为5× 105cells/瓶。
质量检测:澳睿赛实验室分离的人脑静脉血管内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定 ,纯度可达90%以上 ,且不含有HIV-1、 HBV、 HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
人脑静脉血管内皮细胞体外培养周期有限;建议使用澳睿赛配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
二、细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
三、使用方法
人脑静脉血管内皮细胞是一种贴壁细胞 ,细胞形态呈内皮细胞样 ,在澳睿赛技术部标准操作流 程下 ,细胞可传2-3代;建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完
全培养基终止消化;
3)用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
3. 细胞收货脱落
1)收集所有细胞悬液,1000rpm,离心5min,保留沉淀;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中,重悬沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min);消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化;
3)经1000rpm,离心5min,丢弃上清,用5ml完全培养基(补加1%FBS,促进贴壁)重悬沉淀,接种于新的培养瓶内;
4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。
5)原瓶内贴壁细胞按正常消化处理。
4. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验;
包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
四、注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和澳睿赛技术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
5. 该细胞只可用于科研。
1)本产品未通过直接用于活体动物和人的审核
2)本产品未通过用于活体诊断的审核
备注:由于实验所用试剂、操作环境及操作手法的不同,以上方法仅供各实验室参考
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